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摘 要：目的：讨论ABO血型鉴定时的影响因素。方法：对800例患者采用玻片法和试管法进行血型鉴定。结果：玻片法和试管法存在一定结果不相同的情况，玻片法准确率低于试管法。结论：血型鉴定存在一定的影响因素，血型鉴定时应综合考虑。
关键词：ABO血型；血型鉴定。
【中图分类号】R446.6
血型是人类血液以血型抗原为表现形的遗传性状，ABO血型系统和RH血型系统是红细胞的两大血型抗原抗体系统，在临床输血和血液遗传学研究上有重要意义。血型鉴定是临床输血的首要问题，正确的血型鉴定是保证输血安全的前提条件。临床常用的血型鉴定方法有盐水凝集法和凝胶微柱法。盐水凝集法因简单易行在临床上广泛应用，其又分为玻片法和试管法，结果在实际操作中会受到诸多因素的影响。本文通过对800名住院患者进行玻片法和试管法的血型鉴定通过对其结果分析，探讨ABO血型鉴定中的影响因素。
一、资料与方法
（一）资料 从2013年6月-2013年12月本院需进行血型鉴定的住院患者800名，每人抽取edta抗凝血，在2小时内用玻片法和试管法完成血型鉴定。
（二）试剂 人abo血型反定型用红细胞试剂盒，上海血液生物医药有限责任公司；抗a、抗b血型鉴定单克隆抗体；长春博德生物技术有限公司提供。
（三）方法 正定型法：① 玻片法：取清洁且带有圆形凹陷的推片1张，并注明A、B字样。将抗A试剂、抗B试剂各1滴分别滴于玻片上A、B处。分别取等体积待检血样（5%红细胞悬液或全血）于抗A试剂和抗B试剂。另取洁净推片1张，标明A细胞、B细胞和0细胞，用滴管各加受检者血清1滴，再分别用滴管滴加A、B和0型试剂红细胞悬液1滴。用不同的竹签将分型试剂与待检血样调匀，同时不停的摇动玻片并观察血型凝集（或溶血）反应，也可用低倍镜观察结果。②试管法：取洁净小试管2支，分别标上抗A、B字样，分别加入抗A、抗B标准血清各1滴，于相应标记的试管；然后分别加入被检者5%红细胞生理盐水悬液l滴于各试管充分混匀；以1000转/分的速度离心1分钟。将试管轻轻摇动，使沉于管底的红细胞浮起，先以肉眼观察有无凝集（或溶血）现象。
反定型法：首先将待检血以2500转/分离心3分钟，分离血清；取小试管3支，分别标记A、B、O，各管加被检者血清1滴，然后按标记分别加入5% 的A、B、O型标准红细胞生理盐水1滴，混匀；以1000转/分离心1分钟后取出试管，轻摇管底，观察凝集。
结果判断：凝集判断标准红细胞均匀分布，无凝集颗粒，显微镜下红细胞分散存在，无凝集靠拢现象为阴性，红细胞出现凝集为阳性。
二、结果
玻片法检验结果：O型253人 ；B型205人 ；A型202人；AB型140人
试管法检验结果：O型260人； B型201人； A型199人； AB型140人
不论是玻片法还是试管法，800名受检者 的血型分布是一致的，即O型最多，之后依次为B型、A型、AB型，即O>B>A>AB。② 玻片法和试管法的鉴定结果显示AB型人数相同，而A型、B型和O型人数不完全一致，存在一定的差异。
三、讨论
血型由血型基因决定，是血细胞的主要特征之一，在临床输血和血液遗传学研究上有重要意义。输血安全是临床输血的首要问题，正确的血型鉴定是保证输血安全的前提条件。
（一）医务人员的问题 临床医生在填写输血申请时，没有做血型检测，单凭印象或听信患者的自诉血型而造成血型错误；临床护士在抽取血标本时，未校对患者的姓名、床号，仅凭印象，抽了其他人的血液而造成血型报告错误或交叉配血不合；检验科人员没有对报告核对正确，造成血型鉴定错误。
（二）被检红细胞
①血型测定的错误血型：检测时，因患者红细胞悬液浓度过低，又只用肉眼观察结果，使之在血型抗原较弱的情况下，微弱、细小的凝集未看到，而造成定型报告错误。②标本新鲜，严防污染。细菌污染的标本，红细胞上t抗原被激活，与标准血清中的抗t抗体结合，出现全凝集现象，干扰血型鉴定。当疑有血浆成分干扰血型鉴定时，可用生理盐水反复洗涤红细胞以除去干扰。③ 冷凝集素属于冷反应性的自身抗体，4℃ 条件下，正常人血清中的冷凝集素效价低于1：16，冷凝集素效价增高是导致献血者血型正反定型不符的常见情况。在较低温度条件下，冷凝集素能够与标准红细胞和自身红细胞产生凝集现象，凝集强度随着温度的升高而减弱。低效价的冷凝集素在37℃不能凝集标准rbc和自身rbc，因此不会造成血型误判，但高效价的冷凝集素在37℃仍可产生较强凝集，容易造成血型误判。④ abo亚型在血型血清学试验中是导致正反定型不符的主要原因之一。亚型属于同一血型抗原，是由基因所决定的抗原结构和位点数改变导致的弱表现型。⑤ abo血型抗体减弱：abo血型规则抗体合成量的不足也是造成正反定型不符的重要因素。当献血者血清中抗a和抗b效价减弱，其反定型格局总表现为ab型。在这种情况下，可以通过增加血清用量，降低反应温度，延长反应时间，应用低离子强度溶液等方法，检出低效价的抗a和抗b。
（三）实验器材
① 所用器材必须清洁、干燥，试管、滴管要专用，标记清楚。②用试管法定型时，应同时进行正向和反向定型。每批测定均须设置对照。③红细胞浓度按要求配制，红细胞与相应抗体的比例适当。④反应温度、反应时间、离心时间是血型鉴定的重要影响因素，要按操作规程严格控制。
（四）其它因素
① 经输血或妊娠等免疫刺激产生，在献血者中常见的不规则抗體是抗m、抗n和抗a等。在反定型试验中，不规则抗体可以和标准红细胞上相应的抗原发生凝集反应，而这种反定型结果与a或b抗原无关，所以导致abo血型鉴定时正反定型结果不一致。②类b抗原某些受肠道革兰氏阴性杆菌感染的病人，红细胞获得了类b抗原，a型病人可误定为ab型，o型误定为b型。因此，感染体征病人配血不合时，应考虑类b。③磺胺类药物引起的凝集有人报道一个b型的献血员阑尾术后用氨苯磺胺，3个月后，其血清能凝集a、ab型的红细胞，也能凝集b型的红细胞。另外，注射青霉素后，有些人的血清中含有青霉素抗体，而青霉素已吸附在红细胞表面，当此红细胞与含有青霉素抗体的血清相遇时便发生凝集。
因此，在具备认真的工作态度的基础上，还需要不断积累丰富的血型鉴定经验，对异常结果进行系统全面地分析，查明原因，以获得abo血型的准确定型，确保安全输血。
参考文献
[1]卫生部医政司：《全国临床检验操作规程》第3版，2005.
关键词：ABO血型；血型鉴定。
【中图分类号】R446.6
血型是人类血液以血型抗原为表现形的遗传性状，ABO血型系统和RH血型系统是红细胞的两大血型抗原抗体系统，在临床输血和血液遗传学研究上有重要意义。血型鉴定是临床输血的首要问题，正确的血型鉴定是保证输血安全的前提条件。临床常用的血型鉴定方法有盐水凝集法和凝胶微柱法。盐水凝集法因简单易行在临床上广泛应用，其又分为玻片法和试管法，结果在实际操作中会受到诸多因素的影响。本文通过对800名住院患者进行玻片法和试管法的血型鉴定通过对其结果分析，探讨ABO血型鉴定中的影响因素。
一、资料与方法
（一）资料 从2013年6月-2013年12月本院需进行血型鉴定的住院患者800名，每人抽取edta抗凝血，在2小时内用玻片法和试管法完成血型鉴定。
（二）试剂 人abo血型反定型用红细胞试剂盒，上海血液生物医药有限责任公司；抗a、抗b血型鉴定单克隆抗体；长春博德生物技术有限公司提供。
（三）方法 正定型法：① 玻片法：取清洁且带有圆形凹陷的推片1张，并注明A、B字样。将抗A试剂、抗B试剂各1滴分别滴于玻片上A、B处。分别取等体积待检血样（5%红细胞悬液或全血）于抗A试剂和抗B试剂。另取洁净推片1张，标明A细胞、B细胞和0细胞，用滴管各加受检者血清1滴，再分别用滴管滴加A、B和0型试剂红细胞悬液1滴。用不同的竹签将分型试剂与待检血样调匀，同时不停的摇动玻片并观察血型凝集（或溶血）反应，也可用低倍镜观察结果。②试管法：取洁净小试管2支，分别标上抗A、B字样，分别加入抗A、抗B标准血清各1滴，于相应标记的试管；然后分别加入被检者5%红细胞生理盐水悬液l滴于各试管充分混匀；以1000转/分的速度离心1分钟。将试管轻轻摇动，使沉于管底的红细胞浮起，先以肉眼观察有无凝集（或溶血）现象。
反定型法：首先将待检血以2500转/分离心3分钟，分离血清；取小试管3支，分别标记A、B、O，各管加被检者血清1滴，然后按标记分别加入5% 的A、B、O型标准红细胞生理盐水1滴，混匀；以1000转/分离心1分钟后取出试管，轻摇管底，观察凝集。
结果判断：凝集判断标准红细胞均匀分布，无凝集颗粒，显微镜下红细胞分散存在，无凝集靠拢现象为阴性，红细胞出现凝集为阳性。
二、结果
玻片法检验结果：O型253人 ；B型205人 ；A型202人；AB型140人
试管法检验结果：O型260人； B型201人； A型199人； AB型140人
不论是玻片法还是试管法，800名受检者 的血型分布是一致的，即O型最多，之后依次为B型、A型、AB型，即O>B>A>AB。② 玻片法和试管法的鉴定结果显示AB型人数相同，而A型、B型和O型人数不完全一致，存在一定的差异。
三、讨论
血型由血型基因决定，是血细胞的主要特征之一，在临床输血和血液遗传学研究上有重要意义。输血安全是临床输血的首要问题，正确的血型鉴定是保证输血安全的前提条件。
（一）医务人员的问题 临床医生在填写输血申请时，没有做血型检测，单凭印象或听信患者的自诉血型而造成血型错误；临床护士在抽取血标本时，未校对患者的姓名、床号，仅凭印象，抽了其他人的血液而造成血型报告错误或交叉配血不合；检验科人员没有对报告核对正确，造成血型鉴定错误。
（二）被检红细胞
①血型测定的错误血型：检测时，因患者红细胞悬液浓度过低，又只用肉眼观察结果，使之在血型抗原较弱的情况下，微弱、细小的凝集未看到，而造成定型报告错误。②标本新鲜，严防污染。细菌污染的标本，红细胞上t抗原被激活，与标准血清中的抗t抗体结合，出现全凝集现象，干扰血型鉴定。当疑有血浆成分干扰血型鉴定时，可用生理盐水反复洗涤红细胞以除去干扰。③ 冷凝集素属于冷反应性的自身抗体，4℃ 条件下，正常人血清中的冷凝集素效价低于1：16，冷凝集素效价增高是导致献血者血型正反定型不符的常见情况。在较低温度条件下，冷凝集素能够与标准红细胞和自身红细胞产生凝集现象，凝集强度随着温度的升高而减弱。低效价的冷凝集素在37℃不能凝集标准rbc和自身rbc，因此不会造成血型误判，但高效价的冷凝集素在37℃仍可产生较强凝集，容易造成血型误判。④ abo亚型在血型血清学试验中是导致正反定型不符的主要原因之一。亚型属于同一血型抗原，是由基因所决定的抗原结构和位点数改变导致的弱表现型。⑤ abo血型抗体减弱：abo血型规则抗体合成量的不足也是造成正反定型不符的重要因素。当献血者血清中抗a和抗b效价减弱，其反定型格局总表现为ab型。在这种情况下，可以通过增加血清用量，降低反应温度，延长反应时间，应用低离子强度溶液等方法，检出低效价的抗a和抗b。
（三）实验器材
① 所用器材必须清洁、干燥，试管、滴管要专用，标记清楚。②用试管法定型时，应同时进行正向和反向定型。每批测定均须设置对照。③红细胞浓度按要求配制，红细胞与相应抗体的比例适当。④反应温度、反应时间、离心时间是血型鉴定的重要影响因素，要按操作规程严格控制。
（四）其它因素
① 经输血或妊娠等免疫刺激产生，在献血者中常见的不规则抗體是抗m、抗n和抗a等。在反定型试验中，不规则抗体可以和标准红细胞上相应的抗原发生凝集反应，而这种反定型结果与a或b抗原无关，所以导致abo血型鉴定时正反定型结果不一致。②类b抗原某些受肠道革兰氏阴性杆菌感染的病人，红细胞获得了类b抗原，a型病人可误定为ab型，o型误定为b型。因此，感染体征病人配血不合时，应考虑类b。③磺胺类药物引起的凝集有人报道一个b型的献血员阑尾术后用氨苯磺胺，3个月后，其血清能凝集a、ab型的红细胞，也能凝集b型的红细胞。另外，注射青霉素后，有些人的血清中含有青霉素抗体，而青霉素已吸附在红细胞表面，当此红细胞与含有青霉素抗体的血清相遇时便发生凝集。
因此，在具备认真的工作态度的基础上，还需要不断积累丰富的血型鉴定经验，对异常结果进行系统全面地分析，查明原因，以获得abo血型的准确定型，确保安全输血。
参考文献
[1]卫生部医政司：《全国临床检验操作规程》第3版，2005.