可生物素化sH-2D^d-HBs复合物的构建及鉴定

来源 :医学分子生物学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：gardeeen

【摘要】

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目的构建可生物素化sH-2D^d-HBs复合物。方法采用RT-PCR技术，从BALB／c小鼠脾细胞中克隆出H-2D^d基因的胞外区和β2m基因，将前者拼接上依赖BirA酶的可生物素化序列(BSP)后，分别装

【作者】

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吴珺郝友华丁红晖龚非力杨东亮

【机构】

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华中科技大学同济医学院附属同济医院临床免疫研究室武汉市,华中科技大学同济医学院免疫学研究所武汉市

【出处】

：

医学分子生物学杂志

【发表日期】

：

2004年3期

【关键词】

：

H-2D^d Β2微球蛋白基因表达复性 H-2Ddβ2-microglobulin gene expression renaturation

【基金项目】

：

国家重点基础研究发展规划项目(973计划)(No.20014CB510008)

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目的构建可生物素化sH-2D^d-HBs复合物。方法采用RT-PCR技术，从BALB／c小鼠脾细胞中克隆出H-2D^d基因的胞外区和β2m基因，将前者拼接上依赖BirA酶的可生物素化序列(BSP)后，分别装入pET-28a(+)高效表达载体，诱导表达后纯化目的蛋白。将上述过程制备的sH-2D^d-BSP作为重链，β2m作为轻链，与H-2D^d限制性9肽(HBs201～209氨基酸)在体外稀释复性。结果原核表达载体pET-sH-2D^d-BSP和pET-2m的测序结果与GeneBank所公布的序列一致。对表

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