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应用双重套式ＰＣＲ技术同时检测发酵支原体和穿通支原体。方法以支原体１６ＳｖＲＮＡ基因为靶基因，外套引物为Ｍｆ与Ｍｐｅ共用、内套引物则分别为Ｍｆ种特异和Ｍｐｅ种特异，建立双重套式扩增体系。结果本双重套式ＰＣＲ不仅能分别扩增Ｍｆ和Ｍｐ的特异性ＤＮＡ，并能同时扩增Ｍｆ和Ｍｐｅ出现二条特征性条带，产物经测序证实。结论双重套式ＰＣＲ是一种灵敏、特异和快速的Ｍｆ和Ｍｐｅ的检测方法。