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OPG成熟肽N端D1～D4结构域仅由2个外显子编码，以人基因组DNA作为模板，PCR分别扩增骨保护素基因外显子2和外显子3，再以2种PCR产物的混合物作为模板，采用重组PCR法得到N端D1～D4域编码序列，使该序列与载体pET42a部分序列相连，然后克隆入载体pET42a进行表达，SDS—PAGE表明产物主要以包涵体形式存在，可被抗OPG多克隆抗体识别．Glutathione Sepharose 4B亲和层析纯化融合蛋白GST-hOPG（D1—4），Xa切割祛除担体蛋白及进一步分离纯化．采用破骨细胞样细胞