【摘 要】
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在后基因组时代,基因研究的焦点已经转移到每个人的基因组,因此迫切需要高通量的测序方法.近几年,出现了基于焦磷酸的新测序方法--大规模并行焦磷酸测序技术.在这项技术中,双
【机 构】
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河北医科大学生物化学与分子生物学教研室,石家庄,050017
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在后基因组时代,基因研究的焦点已经转移到每个人的基因组,因此迫切需要高通量的测序方法.近几年,出现了基于焦磷酸的新测序方法--大规模并行焦磷酸测序技术.在这项技术中,双链DNA首先被片段化,每单个寡核苷酸链分子结合到磁珠支持物上,用乳液PCR对结合的片段进行扩增.扩增后的片段-磁珠复合物被分别置于光纤芯片上的皮升级反应容器中.然后将DNA聚合酶、ATP硫酸化酶、荧光素酶、三磷酸腺苷二磷酸酶等反应试剂加入到反应容器,经过聚合、硫酸化、氧化即可产生强度与结合的核苷酸数目线性相关的光信号,每个反应容器发出的光就能被探测到.利用这项技术在4.5 h内可测序2000万～3000万碱基对,准确度达到99%或更高,并且无需在细菌体内进行亚克隆.大规模并行焦磷酸测序开启了个体化基因组学的新时代.
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