论文部分内容阅读
目的 探讨T细胞死亡相关基因8（TDAG8）通过AKT/mTOR参与胰腺癌疼痛作用的机制。方法 将人胰腺癌细胞系SW 1990细胞移植到雌性BALB/c裸鼠胰腺中，建立胰腺癌致痛裸鼠模型。5周龄雌性BALB/C裸鼠48只随机分为假手术组（Sham组）、模型组（Model组）、NC-siRNA组、TDAG8-siRNA组，每组12只。Sham组注射培养基作为对照，NC-siRNA组及TDAG8-siRNA组分别将NC-siRNC、TDAG8-siRNA注射至胰腺癌痛模型裸鼠腹腔中。测量体重及苏木素伊红（HE）染色检测胰腺组织病理学变化。实时荧光定量PCR （RT-qPCR）检测脊髓背角组织中TDAG8的表达；检测各组裸鼠驼背评分及腹部皮肤机械痛阈值；Western blotting检测脊髓背角组织中TDAG8、降钙素基因相关肽（CGRP）、P物质（SP）、丝氨酸/苏氨酸激酶（AKT）、p-AKT、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）、p-mTOR蛋白水平。AKT通路抑制剂LY294002作用胰腺癌痛模型裸鼠，检测各组裸鼠驼背评分以及腹部皮肤机械痛阈值；Western blotting检测脊髓背角组织中CGRP、SP、AKT、p-AKT、mTOR、p-mTOR蛋白水平。结果 BALB/c裸鼠移植SW 1990细胞后，体重显著减轻，观察到胰腺癌细胞呈条索状排列密集，可见炎性细胞浸润，脊髓背角组织TDAG8 mRNA和蛋白水平显著升高，裸鼠驼背评分升高及机械痛阈值显著降低，脊髓背角组织CGRP、SP、p-AKT、p-mTOR蛋白水平显著升高（均P＜0.05）;TDAG8-siRNA和LY294002作用后裸鼠驼背评分降低及机械痛阈值均显著升高，脊髓背角组织CGRP、SP、p-AKT、p-mTOR蛋白水平显著降低（均P＜0.05）。结论 抑制TDAG8可减轻胰腺癌疼痛，其机制可能与抑制AKT/mTOR信号通路的激活有关。