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制备抗中东呼吸综合征冠状病毒(Middle East respiratory syndrome coronavirus，MERS-CoV)刺突蛋白(S)受体结合区(receptor binding domain，RBD)的单克隆抗体(单抗),并对其特性进行鉴定。
方法将昆虫-杆状病毒表达的MERS-CoV S蛋白RBD片段纯化后免疫BALB/c小鼠，取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞Sp2/0融合，通过有限稀释法筛选阳性克隆，用酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫印迹法(Western blot)和MERS-CoV假病毒中和试验对所获得的细胞克隆进行筛选和鉴定。
结果共筛选出12株杂交瘤细胞，ELISA证实其分泌的单抗与MERS-CoV S蛋白RBD片段有特异反应；双抗体夹心法鉴定其中两株单抗2E4和2F3为免疫球蛋白IgM型，其余10株均为IgG1型；MERS-CoV假病毒中和试验结果显示4株单抗：1F1、2E4、3C3、3E6有中和活性；Western blot分析表明单抗1F1、2E4、3C3、3E6能特异识别MERS-CoV S蛋白，而不与SARS-CoV S蛋白的RBD反应。
结论我们制备了12株针对MERS-CoV S蛋白RBD的鼠源单抗，所获杂交瘤细胞株特异性强，分泌抗体性能稳定，其中4株具有中和活性。