人血清白蛋白在乳酸克鲁维酵母中的表达

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以乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyces lactis,K.lactis)GG799为宿主对人血清白蛋白(HSA)进行分泌表达。以pPIC9k—HSA为模板,采用带有XhoI和NotI酶切位点的引物PCR扩增获得HSA基因,经xhoI和NotI双酶切后插入pKLACl,构建表达载体pKLAC-HSA。经SaⅡ线性化后,电击转化尼lactis GG799,用含5mmoL/L乙酰胺的YCB平板筛选阳性转化子。提取基因组DNA,采用PCR方法对转化子鉴定后进行摇瓶发酵。十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳(S
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