FTH1在布鲁氏菌侵染宿主细胞中的作用

来源 :石河子大学学报(自然科学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:coniji
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为了探究布鲁氏菌侵染宿主巨噬细胞过程中铁蛋白(FTH1)生物学功能,本研究根据 FTH1蛋白核苷酸序列,分别设计4条特异性小干扰 RNA (short interfering RNA,siRNA)分子,亚克隆到 RNAi-Ready pSIREN-RetroQ ZsGreen载体,并转染 RAW264.7巨噬细胞,实时定量PCR筛选干扰效果最优的质粒;布鲁氏菌侵染干扰前、后的 RAW264.7巨噬细胞,实时定量 PCR 检测布鲁氏菌基因16S rRNA 和细胞凋亡相关基因的 mRNA 表达量。结果显示:获得了4条特异性siRNA分子,经测序正确,pSIREN-C siRNA 质粒对 FTH1干扰效果最高可达98%。干扰后布鲁氏菌侵染抑制率为84%,凋亡相关基因的 mRNA 表达量5个降低,3个上升。本研究表明: FTH1基因沉默后布鲁氏菌胞内的生存能力下降;布鲁氏菌侵染可以抑制细胞凋亡发生,FTH1基因沉默后细胞凋亡升高。
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