五条蚋ISSR-PCR反应体系的建立与优化

来源 :贵州科学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：limingxing0623

【摘要】

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通过正交试验及单因素试验对五条蚋S．quinquestriatumISSH。PCR反应体系中的引物、DNA模板、dNTP、Mg2＋、BSA、TaqDNA聚合酶浓度6个关键因素进行优化，建立五条蚋ISSR最适反应体

【作者】

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修江帆张春林陈汉彬

【机构】

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贵阳医学院生物学教研室

【出处】

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贵州科学

【发表日期】

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2013年3期

【关键词】

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五条蚋 ISSR 正交设计单因素优化 Simulium quinquestriatum ISSR orthogonal design single f

【基金项目】

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国家自然科学基金资助项目（No.39460073）,贵阳医学院青年教师科研基金（K2011-39）.

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通过正交试验及单因素试验对五条蚋S．quinquestriatumISSH。PCR反应体系中的引物、DNA模板、dNTP、Mg2＋、BSA、TaqDNA聚合酶浓度6个关键因素进行优化，建立五条蚋ISSR最适反应体系：20μl反应体系中引物1．0μmol／L、DNA模板50．0ng／v．1、dNTP0．15mmol／L、Mg2＋1．50mmol／L、BSA2．00mg／ml、TaqDNA聚合酶0．155U／μl。通过对24条备选引物进行温度梯度筛选，获得8条能够稳定扩增且多态性较好的引物。为今后利用ISSR

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