【摘 要】
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目的:探讨抑制Wnt/β-catenin信号通路对脓毒症急性肺损伤(ALI)的影响.方法:选取(250±10)g健康成年SD雄性大鼠50只,随机分为3组:对照组10只、脓毒症ALI组(CLP组)20只、脓毒症ALI治疗组(CLP+XAV939组)20只.统计各组大鼠体重下降率及死亡率,取肺组织观察肺组织病理学变化,通过蛋白印迹法(WB)、免疫组化(IHC)、免疫荧光(IF)、实时定量PCR等技术检测Wnt/β-catenin信号通路关键蛋白(TNF-α、β-catenin、Cyc-lin D、LRP5/6
【机 构】
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华中科技大学同济医学院附属同济医院重症医学科,湖北武汉 430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院急诊科,湖北武汉 430030;华中科技大学同济医学院附属同济医院综合医疗科,湖北武汉 4300
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目的:探讨抑制Wnt/β-catenin信号通路对脓毒症急性肺损伤(ALI)的影响.方法:选取(250±10)g健康成年SD雄性大鼠50只,随机分为3组:对照组10只、脓毒症ALI组(CLP组)20只、脓毒症ALI治疗组(CLP+XAV939组)20只.统计各组大鼠体重下降率及死亡率,取肺组织观察肺组织病理学变化,通过蛋白印迹法(WB)、免疫组化(IHC)、免疫荧光(IF)、实时定量PCR等技术检测Wnt/β-catenin信号通路关键蛋白(TNF-α、β-catenin、Cyc-lin D、LRP5/6)表达在3组之间的差异性.结果:CLP组48h内死亡率为40％,而对照组和CLP+XAV939组无大鼠死亡.对照组大鼠术后48 h体重无变化,而CLP组大鼠体重下降20％,CLP+XAV939组下降10％.组织病理学表现,对照组可见完整的肺泡结构,未见炎症细胞浸润;CLP组见肺泡水肿和塌陷,肺泡间隔增厚增宽并有大量炎症细胞浸润,肺血管充血明显;CLP+XAV939组可见基本完整的肺组织结构,炎症细胞数量及分部范围较CLP组减小.WB显示,与对照组比较,CLP组、CLP+XAV939组Wnt/β-catenin信号通路关键蛋白表达量上升,且CLP组高于CLP+XAV939组(P＜0.01或P＜0.05).实时定量PCR示,CLP组β-catenin mRNA表达量较对照组增高(P＜0.05),CLP+XAV939组与对照组无差异.IHC示,与对照组比较,CLP组和CLP+XAV939组肺内多种细胞内β-catenin蛋白表达量明显增多,且CLP组多于CLP+XAV939组(P＜0.05).IF示,与对照组比较,CLP组和CLP+XAV939组肺内LRP5/6表达量明显升高,且CLP组高于CLP+XAV939组(P均＜0.05).结论:Wnt/β-catenin信号通路参与脓毒症ALI过程,腹腔注射XAV939抑制Wnt/β-catenin信号通路可减轻ALI.
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