TGEV双基因嵌合表达质粒pVAX—S—N的构建及体外表达

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采用RT—PCR扩增猪传染性肠胃炎病毒(TGEV)SC—H株S基因5’端主要抗原位点片段和N基因,插入pMD19-T载体,经酶切与测序鉴定后,构建重组质粒19T—N与19TS。从T载体上将S、N基因切下,以亚克隆方法插入真核表达载体pVAX1,构建嵌合表达S、N基因的重组质粒pVAX-S-N。对重组质粒PCR与酶切鉴定后,以脂质体转染法转染COS7细胞,间接免疫荧光检测转染后细胞外源基N的表达情况。结果表明,重组质粒构建正确且在COs7细胞中得到表达,转染的细胞呈现特异性荧光。真核表达质粒pVAX-S-N
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