论文部分内容阅读
目的 探讨信号转导和转录激活因子3(STAT3)信号通路在多亮氨酸重复区免疫球蛋白样蛋白1(LRIG1)诱导人脑胶质瘤细胞株U251细胞凋亡中的作用及机制.方法 传代培养U251细胞,随机分为对照组、空载体组及实验组,应用脂质体介导的基因转染技术分别将磷酸盐缓冲液(PBS)、PEGFP-N1质粒体、PEGFP-LRIG1质粒体转染入各组细胞,应用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞体外生长活性,膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)/碘化丙锭(PI)法经流式检测各组细胞凋亡率,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法测定各组细胞中STAT3的mRNA表达,Westernblot法测定各组细胞中STAT3、磷酸化STAT3(p-STAT3)、B淋巴细胞/白血病-2(bcl-2)、bax的蛋白表达.结果 成功转染LRIG1,实验组细胞中LRIG1基因表达明显上调(P＜0.05)；实验组细胞增殖显著受抑,48 h抑制率为(45.12±0.68)％,72 h抑制率为(52.24±1.77)％,总凋亡率由(2.54±0.43)％增高至(22.51±2.12)％ (P ＜0.05)；RT-PCR检测显示实验组细胞中STAT3 mRNA表达明显降低；Western blot检测显示实验组细胞中STAT3蛋白表达及磷酸化水平明显降低,bcl-2表达明显降低,bax表达明显升高.结论 LRIG1可促进U251细胞凋亡,其机制可能是通过下调STAT3信号通路,进而抑制STAT3激活的抗凋亡途径。