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背景已有研究发现,转化生长因子α(transforminggrowthfactoralpha,TGFα)与胃癌发生发展关系密切.肿瘤的发生及其恶性增生与细胞周期调控系统cyclins-CDKs-CKIs调节紊乱、细胞增殖失控密切相关.在该系统中,细胞由G1期向S期过度时,主要由cyclinD1和E起作用.有关TGFα影响细胞周期调控系统以促进肿瘤细胞增殖的研究,报道尚较少.
目的探讨TGFα对胃癌细胞cyclinE和D1表达的促进作用,为研究TGFα促胃癌发生发展机制提供重要信息.
方法①细胞体外培养,用无血清RPMI-1640阻断法进行G0/G1期同步化,用碘化丙啶(Propidiumlodide,PI)染色和流式细胞术,检测其同步化率;②细胞经G0/G1期同步化后,给予2.5%的低浓度血清+RPMI-1640处理,以及在此基础上分别加入TGFα10、30、50ug/L处理,均作用5h;用免疫荧光染色及流式细胞术,检测细胞cyclinE和D1的表达情况.
结果①细胞经无血清RPMI-1640阻断法处理,其G0/G1期的百分率由常规培养的54%上升到72%;②加入TGFα处理后,细胞cyclinE和D1表达均显著高于单用低血清培养(均P<0.001=,并随TGFα剂量的增加而增加;当TGFα浓度为50ug/L时,两者的表达与单用低血清培养比,分别增加了25.18%和27.52%(均P<0.001=.
结论TGFα可显著促进胃癌细胞cyclinE和D1的表达,从而发挥其促细胞周期进程作用。