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目的
通过改良去污剂联合酶法(DEM)制备周期短、成本低的兔气管脱细胞基质并评价其性能。
方法采用改良DEM对新西兰大白兔气管进行脱细胞处理，通过宏观测量和生物力学测试分析脱细胞基质力学结构；组织学染色观察基质微观结构改变；细胞毒性试验检测基质的体外生物相容性；同种异体埋植术后苏木精-伊红(HE)染色和CD68分子标记评估基质的体内生物相容性；采用t检验和方差分析对各组数据进行统计学分析。
结果2个改良DEM周期处理后，弹性模量[(0.544±0.073) N/mm2]较原生气管[(0.598±0.042) N/mm2]仅轻微下降；组织学染色显示上皮和黏膜层细胞被完全去除，糖胺聚糖含量下降；免疫组织化学染色显示，脱细胞后非软骨区主要组织相容性复合体(MHC)低表达；细胞计数试剂盒(CCK-8)证实在第3～5天骨髓间充质干细胞在2周期组表达高于原生组(第5天，0.484±0.027比0.421±0.014)，差异有统计学意义(t＝－3.557，P<0.05)；术后染色表明脱细胞基质的结构保持相对完整，炎性细胞浸润较少。
结论经过2个周期的改良DEM处理，可获取与原生气管结构及生物力学性能相似、低免疫原性的兔脱细胞气管基质。本方案制备周期短、成本低、污染风险小，可用于组织工程气管移植研究。