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利用PCR技术扩增出鸭瘟病毒(DPV)生长非必需的TK基因(约1.1kb)。将其克隆入pGEM—T easy载体获得载体pGTK。根据已知的绿色荧光蛋白载体pEGFP-C1的序列设计了一对引物,PCR扩增出pEGFP-C1上含CMV启动子、EGFP及其多克隆位点的完整的基因表达盒插入pGTK的TK上,获得质粒pGTK—EGFP。根据Genbank已发表的H5N1亚型禽流感病毒的血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)基因序列,设计了两对引物。分别从pT—HA和pT—NA两个质粒上扩增出HA和NA基因,克隆到pG