猪粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(pGM-CSF)基因的克隆与原核表达

来源 :农业生物技术学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chzhao2005
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通过RT-PCR方法,从经ConA刺激的猪外周血淋巴细胞中扩增出猪粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(pGM-CSF)编码区的cDNA并将其克隆至pMD-19T载体,序列测定表明pGM-CSF基因的长度为435bp,编码144个氨基酸。通过PCR方法获得缺失其N端17个氨基酸残基信号肽序列的成熟pGM—CSF蛋白基因,将其克隆至原核表达载体pET-32a(+),构建重组表达质粒pET-GM并转入大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)中进行诱导表达。经SDS—PAGE电泳和Western
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