论文部分内容阅读
【目的】构建适合新疆野苹果自交不亲和基因的PCR扩增程序的优化体系。【方法】采用单因素比较试验,对影响s—RNase基因PCR反应体系的6个主要因素进行梯度扩增。【结果】在20μL的PCR总反应体系中,Mg2+的最适浓度为2.5mmol/L,dNTP的最适浓度为0.2mmol/L,引物的最适浓度为0.5mmol/L,TaqDNA聚合酶的最适用量为0.75U,模板DNA的最适用量为800ng,最适退火温度为49℃。【结论】利用优化的扩增体系在99个新疆野苹果都获得了有效扩增,证明该体系为进行新疆野苹果s基因