【摘 要】
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根据GenBank中CAV哈尔滨分离株基因序列,设计出针对CAV VP1大片段(608bp)的引物,利用PCR方法从CAV基因组序列中扩增出VP1基因的大片段(608bp),按照正确的读码框克隆到原核表达载体pE
【机 构】
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山东师范大学生命科学学院动物抗性实验室,山东省济南第一中学
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根据GenBank中CAV哈尔滨分离株基因序列,设计出针对CAV VP1大片段(608bp)的引物,利用PCR方法从CAV基因组序列中扩增出VP1基因的大片段(608bp),按照正确的读码框克隆到原核表达载体pET32a(+)上,得到含VP1大片段的pET32a(+)重组子,转化大肠埃希菌BL21(DE3)感受态细胞,IPTG谤导重组蛋白表达,经SDS-PAGE和Western blotting检测发现有分子质量约42ku的融合蛋白表达,与预期分子质量大小一致,通过Ni亲和层析柱纯化出融合蛋白,经West
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