目的　通过观察抗高血糖药物二甲双胍对肝糖异生中的关键限速酶磷酸烯醇丙酮酸羧激酶（PEPCK）基因表达的调节以及胰岛素信号转导抑制剂的影响，探讨二甲双胍在肝细胞中作用的分子机制。方法　培养的小鼠肝癌细胞系（H4IIE）用0.1mmol/L二甲双胍温育16h，并加用不同的调节因子，如胰岛素、环磷酸腺苷（cAMP）、地塞米松、胰岛素信号转导抑制剂等。PEPCK的mRNA水平通过Northernblot分析。结果　治疗浓度0.1mmol/L二甲双胍显著降低了基础PEPCK的mRNA水平约75％（P＜0.01），对cAMP和地塞米松刺激的PEPCKmRNA表达，二甲双胍单独作用无显著性效果，但通过与胰岛素的联合作用可抑制cAMP和地塞米松刺激的PEPCK的基因表达。当培养液中加入0.1nmol/L低浓度胰岛素与二甲双胍共同温育时，cAMP和地塞米松引起的PEPCKmRNA表达显著降低了94％（P＜0.01）。胰岛素信号转导抑制剂如磷脂酰肌醇-3激酶（PI3K）抑制剂渥蔓青霉素（wortmannin）和有丝分裂原激活蛋白激酶（MAPK）抑制剂UO126对二甲双胍的作用无显著影响，但wortmannin显著阻止了胰岛素对PEPCK基因表达的调节作用。结论　二甲双胍可通过独立的非胰岛素信号转导途径或是与胰岛素的联合作用抑制PEPCK的基因表达，胰岛素调节的PEPCK基因表达主要通过信号转导中PI3K途径介导。