【摘 要】
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目的克隆、表达和纯化结核分枝杆菌热休克蛋白65（Heat Shock Protein 65），为研究结核病诊断技术提供基础。方法用PCR方法从结核分枝杆菌H37Rv基因组中分两段扩增出hsp65基因，将上
【机 构】
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西北农林科技大学,第四军医大学实验动物研究中心
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目的克隆、表达和纯化结核分枝杆菌热休克蛋白65（Heat Shock Protein 65），为研究结核病诊断技术提供基础。方法用PCR方法从结核分枝杆菌H37Rv基因组中分两段扩增出hsp65基因，将上下游基因片段分别连接进入pMD18-T载体中，序列测定正确后，通过基因内部的单一酶切位点进行连接。将完整的hsp65基因克隆到pProEX HTa载体并在大肠杆菌DH5口中诱导表达，表达产物经SDS-PAGE和Western-blot分析后，用Ni-NTA亲和层析桂进行纯化。获得的纯化蛋白与10例临床可疑
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