干细胞标志Musashi2基因RNAi腺病毒载体的构建及鉴定

来源 :吉林大学学报(医学版) | 被引量 : 0次 | 上传用户:woshishagua6
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目的:构建人干细胞标志分子Musashi2(Msi2)RNAi腺病毒载体,并检测其在膀胱癌细胞株BIU87中的干扰效果及对细胞增殖的影响。方法:将2对干扰片段msi2-1和msi2-2及阴性对照scramble片段克隆入pSES-HUS穿梭载体,经酶切鉴定及测序后,将测序正确的克隆经PmeⅠ酶切后与pAdeasy-1骨架质粒在BJ5183菌内重组,重组质粒经PacⅠ酶切后转染入293A细胞,进行腺病毒的包装和扩增。Real-time PCR和Western blotting法分别检测腺病毒感染BIU87细
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