【摘 要】
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目的:建立口腔扁平苔藓差异表达基因的cDNA文库.方法:采用改良消减杂交技术,以口腔扁平苔藓病变组织总mRNA为实验组, 采用改良的SMART PCR cDNA 合成技术进行反转录,正常黏膜
【机 构】
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第四军医大学口腔医学院牙周病黏膜病科,第四军医大学口腔医学院组织病理学教研室,第四军医大学口腔医学院儿童牙病科
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目的:建立口腔扁平苔藓差异表达基因的cDNA文库.方法:采用改良消减杂交技术,以口腔扁平苔藓病变组织总mRNA为实验组, 采用改良的SMART PCR cDNA 合成技术进行反转录,正常黏膜组织总mRNA为驱动组,进行扣除杂交,筛选出两组差异表达的cDNA,与T载体进行T/A连接构建文库,然后转化高效感受态大肠杆菌DH5а进行文库扩增,随机挑取阳性克隆进行酶切鉴定.结果:扩增消减cDNA文库获得200余个白色阳性克隆,随机挑取的100个阳性克隆酶切后,含500 bp以上插入片段的克隆64个,占64%.结论
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