PTEN基因真核表达载体的构建及在MG63中表达

来源 :安徽医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:szgang052809
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目的构建PTEN基因真核表达载体,为PTEN基因功能研究提供工具。方法从人淋巴细胞中提取总RNA,采用反转录-聚合酶链反应扩增PTEN基因编码区,将其克隆入pEGFP—N1载体中。通过聚合酶链反应、酶切和DNA测序鉴定所构建的载体。脂质体包裹重组载体转染骨肉瘤MG63细胞,RT—PCR和Westernblot检测转染后的骨肉瘤MG63细胞中PTEN基因mRNA和蛋白质表达情况。结果经过限制性酶切和测序鉴定得到重组子GFP—PTEN大小符合,序列与GenBank中人DNA的PTEN基因(NM_000314)
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