【摘 要】
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目的探讨牙釉质上皮型颅咽管瘤(CP)细胞原代培养及传代方法,检测体外培养CP细胞的生长及生物学特性。方法对病理证实为牙釉质上皮型CP的新鲜组织标本13例,采用显微镜下组织修
【机 构】
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第二军医大学海军临床医学院,海军总医院神经外科,北京军区总医院附属八一儿童医院
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目的探讨牙釉质上皮型颅咽管瘤(CP)细胞原代培养及传代方法,检测体外培养CP细胞的生长及生物学特性。方法对病理证实为牙釉质上皮型CP的新鲜组织标本13例,采用显微镜下组织修剪、胰酶差速贴壁消化法结合机械刮除法建立CP细胞株。用倒置显微镜、苏木精-伊红(HE)染色观察细胞生长情况及细胞形态,透射电镜(TEM)观察细胞超微结构,免疫组化鉴别细胞来源,噻唑蓝(MTT)比色法绘制细胞增殖曲线,并用流式细胞仪(FCM)分析细胞周期。结果 13例CP组织分离纯化并原代培养成功9例(69.23%)、传代培养成功7例(53.85%),最长传7代,存活63 d。广谱角蛋白免疫组织化学鉴定CP细胞纯化良好。第2代CP细胞比第6代生长稳定、存活时间长。第2代CP细胞为典型上皮样形态及二倍体细胞,细胞周期主要集中G0-G1和G2-M期。结论牙釉质上皮型CP细胞原代纯化培养获得成功,可进行有限地连续传代培养,其存活时间及生长状态可满足进一步处理实验要求。
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