人microRNA-338-3p慢病毒表达载体的构建及其靶基因鉴定

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【摘要】

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目的构建人microRNA-338-3p（has-miR-338-3p）慢病毒表达载体并初步筛选鉴定miR-338-3p的靶基因。方法由miRBase数据库查找获得miR-338-3p前体序列，设计目的基因片段并人工合成；将

【作者】

：

邓海军孙凯郭琛李凌李国新

【机构】

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南方医科大学南方医院普通外科,南方医科大学生物技术学院,南方医科大学公共卫生与热带医学学院

【出处】

：

南方医科大学学报

【发表日期】

：

2012年8期

【关键词】

：

结直肠癌 Has-microRNA-338—3p SMOOTHENED 慢病毒 eolorectal carcinoma Has-miR-338-3p Sm

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目的构建人microRNA-338-3p（has-miR-338-3p）慢病毒表达载体并初步筛选鉴定miR-338-3p的靶基因。方法由miRBase数据库查找获得miR-338-3p前体序列，设计目的基因片段并人工合成；将miR．338．3p前体序列和pLV-THM载体经双酶切后连接，产生pLV-THM．miR-338-3p慢病毒表达载体，双酶切后测序鉴定，筛选阳性克隆；以pLV-THM-miR-338-3p、psPAX2和pMD2．G质粒共转染包装细胞293T，包装产生慢病毒并测定滴度。流式细胞仪筛选

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