小鼠B7-H4原核表达载体的构建、表达及多克隆抗体的制备

来源 :广东医学院学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：yuanyeah

【摘要】

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目的探讨小鼠B7-H4原核表达载体的构建、表达及多克隆抗体的制备。方法采用特异性引物扩增小鼠B7-H4（mB7-H4）胞外功能区DNA,经酶切、拼接构建原核表达载体pET28a-mB7-H4。将构

【作者】

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肖德乾肖欢胡国艳那志萍郑淑华刘伟张良清徐军发

【机构】

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广东医学院检验医学研究所,广东医学院附属医院麻醉科

【出处】

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广东医学院学报

【发表日期】

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2009年5期

【关键词】

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B7-H4 原核表达载体基因表达多克隆抗体 B7-H4 prokaryotic expression vector gene expression p

【基金项目】

：

广东省科学事业费计划项目（No.20061336002021）,广东医学院博士基金项目（No.B2006091）,广东省医学科研课题（No.A2007450）.

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目的探讨小鼠B7-H4原核表达载体的构建、表达及多克隆抗体的制备。方法采用特异性引物扩增小鼠B7-H4（mB7-H4）胞外功能区DNA,经酶切、拼接构建原核表达载体pET28a-mB7-H4。将构建的重组表达质粒转化入E.coliBL21（DE3）菌株,采用IPTG诱导表达、Ni-NTA柱亲和层析纯化目的蛋白、SDS-PAGE分析蛋白纯度。将纯化的目的蛋白免疫家兔制备多克隆抗体,并对其进行纯化及鉴定。结果序列测定证实了构建的pET28a-mB7-H4重组表达载体含有mB7-H4编码序列,其序列分析与Gen

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