【摘 要】
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目的 探讨转化生长因子β1(TGF-β1)的RNA干扰质粒shRNA-TGF-β1对大鼠移植肾Smads信号通路的影响.方法 以SD大鼠和Wistar大鼠分别作为供、受者,建立大鼠左肾原位移植及移植
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目的 探讨转化生长因子β1(TGF-β1)的RNA干扰质粒shRNA-TGF-β1对大鼠移植肾Smads信号通路的影响.方法 以SD大鼠和Wistar大鼠分别作为供、受者,建立大鼠左肾原位移植及移植肾纤维化加快模型.将受者分为3组,质粒组受者肾移植后转染shRNA-TGF-β1质粒,空质粒组受者肾移植后转染空质粒,单纯移植组受者仅行肾移植,术后不转染任何质粒.另取健康Wistar大鼠作为假手术对照组,仅切除其左肾,不进行肾移植和转染任何质粒.质粒转染采用以流体力学为基础的肾脏基因转染技术.移植后1、2和3个月,采用酶联免疫吸附试验检测各组大鼠血清肌酐(SCr)和尿素氮(BUN)的水平,采用逆转录聚合酶链反应法和蛋白质印迹法分别检测各组大鼠移植肾组织中TGF-β1、磷酸化-Smad3(p-Smad3)和p-Smad7的mRNA和蛋白的表达.结果 术后各检测时点,质粒组SCr和BUN水平显著高于假手术组(P<0.01或P<0.05),但明显低于空质粒组和单纯移植组(P<0.05或P<0.01);质粒组TGF-β1的表达显著高于假手术组(P<0.01或P<0.05),但显著低于空质粒组和单纯移植组(P<0.05或P<0.01);质粒组p-Smad3的表达显著高于假手术组(P<0.01或P<0.05),但明显低于空质粒组和单纯移植组(P<0.01或P<0.05);质粒组p-Smad7表达显著低于假手术组(P<0.01或P<0.05),但明显高于空质粒组和单纯移植组(P<0.01或P<0.05).结论 质粒shRNA-TGF-β1能够显著改善大鼠的移植肾功能,其机制可能是shRNA-TGF-β1可以明显下调信号蛋白p-Smad3的表达,上调p-Smad7的表达,抑制TGF-β1的促纤维化作用,延缓移植肾的纤维化.
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