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目的探讨褪黑素对小鼠肝癌细胞自噬信号通路的影响及作用机制。方法 BALB/c小鼠30只,随机分为对照组、10mg/kg褪黑素组、20mg/kg褪黑素组各10只,3组均皮下注射接种小鼠肝癌H22细胞株,接种剂量为1×10~6细胞/100μL,10mg/kg褪黑素组、20mg/kg褪黑素组分别腹腔注射10、20mg/kg褪黑素0.2mL,1次/d,连续14d,对照组注射等量生理盐水;腹腔注射后14d处死小鼠,取出肿瘤组织,电镜下观察自噬液泡总数,荧光显微镜下计算微管相关蛋白轻链3(microtubule associated protein light chain 3,LC3)-Ⅱ阳性细胞占总细胞数的百分率,Western blot法检测LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ及Beclin-1、蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)、磷酸化Akt(phosphorylated Akt,P-Akt)和哺乳动物雷帕霉素蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)、磷酸化mTOR(phosphorylated mTOR,P-mTOR)表达水平。结果腹腔注射后14d,10、20mg/kg褪黑素组自噬液泡总数[(9.00±2.00)、(11.00±2.00)个]、LC3-Ⅱ阳性细胞百分率[(33.33±10.41)%、(39.67±8.52)%]均高于对照组[(3.00±1.00)个、(10.76±9.17)%],20mg/kg褪黑素组高于10mg/kg褪黑素组(P<0.05);腹腔注射后14d,10、20mg/kg褪黑素组LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ值(51.75±10.82、46.32±8.24)、Beclin-1水平(82.74±16.52、81.63±18.07)均高于对照组(3.45±1.76、17.33±8.62),10 mg/kg褪黑素组LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ值高于20mg/kg褪黑素组(P<0.05),Beclin-1水平与20mg/kg褪黑素组比较差异无统计学意义(P>0.05);10、20mg/kg褪黑素组P-Akt/Akt(38.29±7.88、46.57±9.96)、P-mTOR/mTOR值(28.77±8.16、37.84±6.76)均低于对照组(112.46±8.95、108.85±6.74),10mg/kg褪黑素组低于20mg/kg褪黑素组(P<0.05)。结论褪黑素可通过上调Beclin-1表达,抑制Akt、mTOR的磷酸化来抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路活化,进而促进细胞自噬。