山羊重组促卵泡素长效类似物基因在毕赤酵母中表达

来源 :生物工程学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：liangzi_li

【摘要】

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为了获得长效FSH制剂，利用重叠PCR技术将山羊FSH的α，β亚单位，通过hCGβ亚单位羧基末端延长肽（CTP）基因序列的连接，构建成单链长效类似物基因FSHβ-CTP-α。将其克隆至表达载体pPI

【作者】

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杨欢利赵西彪宋晓娟丁家桐

【机构】

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扬州大学动物科学与技术学院

【出处】

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生物工程学报

【发表日期】

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2008年3期

【关键词】

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山羊促卵泡素长效类似物基因毕赤酵母 follicular-stimulating hormone long-acting analogous gene

【基金项目】

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江苏省自然科学基金项目资助（No.BK2005050）.

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为了获得长效FSH制剂，利用重叠PCR技术将山羊FSH的α，β亚单位，通过hCGβ亚单位羧基末端延长肽（CTP）基因序列的连接，构建成单链长效类似物基因FSHβ-CTP-α。将其克隆至表达载体pPIC9K，重组载体线性化处理后电转化至毕赤酵母GS115中，经判型和G418筛选后获得高拷贝菌株His^＋Mut^＋。经甲醇诱导表达后，进行SDS-PAGE和Western blot分析表明：重组FSHβ-CTP-α的转化子可以正确有效地表达目的蛋白，分子量约为29kD。放射免疫分析法（RIA）测定表达上清，高拷

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