【摘 要】
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为开发罗汉果苷ⅢE的简易制备方法,为开发罗汉果苷类甜味剂提供参考依据。本研究以罗汉果苷Ⅴ为探针筛选糖苷水解酶库,获得了能够区域选择性合成罗汉果苷ⅢE的CPU-GH17,通过
【机 构】
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中国药科大学生命科学与技术学院化学生物学研究室
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(No.81502961);江苏省“六大人才高峰”资助项目(No.SWYY-097)~~
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为开发罗汉果苷ⅢE的简易制备方法,为开发罗汉果苷类甜味剂提供参考依据。本研究以罗汉果苷Ⅴ为探针筛选糖苷水解酶库,获得了能够区域选择性合成罗汉果苷ⅢE的CPU-GH17,通过考察异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)浓度、诱导温度和时间等参数建立了CPU-GH17的高效可溶性表达条件:0.4 mmol/L IPTG、15℃和12 h。在此基础上,针对反应p H、温度、酶量、底物浓度以及反应时间等参数进行系统优化,最终确定pH 6.0、45℃、3 U/mL酶、5 mg/mL底物和20 h时,罗汉果苷Ⅴ可以完全转化成罗
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