【摘 要】
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目的 探索miR-139-5p在棕榈酸(palmitate,PA)诱导胰岛β细胞凋亡中的作用及机制.方法 PA孵育Min6细胞,RT-PCR检测miR-139-5p表达,Western blot检测cleaved caspase 3和Bcl-2蛋白表达,双荧光素酶报告实验验证miR-139-5p与Bcl-2之间的相互作用,GreenNucTM检测凋亡细胞.高脂饲料喂养联合STZ注射建立T2DM小鼠模型,TUNEL检测胰腺组织miR-139-5p表达.结果 过表达miR-139-5p增加cleaved ca
【机 构】
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皖南医学院第一附属医院,弋矶山医院内分泌科,安徽 芜湖 241001;皖南医学院第一附属医院,弋矶山医院内分泌科,安徽 芜湖 241001;安徽省教育厅重大疾病非编码RNA转化研究重点实验室,皖南医学
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目的 探索miR-139-5p在棕榈酸(palmitate,PA)诱导胰岛β细胞凋亡中的作用及机制.方法 PA孵育Min6细胞,RT-PCR检测miR-139-5p表达,Western blot检测cleaved caspase 3和Bcl-2蛋白表达,双荧光素酶报告实验验证miR-139-5p与Bcl-2之间的相互作用,GreenNucTM检测凋亡细胞.高脂饲料喂养联合STZ注射建立T2DM小鼠模型,TUNEL检测胰腺组织miR-139-5p表达.结果 过表达miR-139-5p增加cleaved caspase 3表达和Min6细胞凋亡(P<0.05).在PA孵育的Min6细胞中miR-139-5p表达上调,而抑制miR-139-5p表达降低了cleaved caspase 3蛋白水平和Min6细胞凋亡(P<0.05).荧光素酶报告分析表明miR-139-5p与Bcl-2相互作用,miR-139-5p过表达降低了Bcl-2表达(P<0.05),而PA诱导的Bcl-2表达下调可通过抑制miR-139-5p来恢复(P<0.05).此外,过表达Bcl-2可拮抗miR-139-5p诱导的cleaved caspase 3蛋白上调(P<0.05),并减少凋亡的Min6细胞数量.T2DM小鼠胰腺中miR-139-5p表达增加(P<0.05),胰岛细胞凋亡增多(P<0.05).结论 miR-139-5p抑制Bcl-2表达促进PA诱导的胰岛β细胞凋亡.
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