论文部分内容阅读
本研究的目的是建立检测肝细胞癌患者外周血循环肿瘤细胞的Real-time PCR技术体系,研究肝细胞癌患者围手术期循环肿瘤细胞的变化情况.通过筛选出肝细胞癌CTCs特异性的靶基因并应用Real-time PCR检测靶基因(AFP、GPC3、CK18、CK19、CD133)表达的特异性及灵敏度,建立Real-time PCR检测肝细胞癌CTCs技术体系,检测外周血中以mRNA为标记的CTC数目.确定了AFP、GPC3和CK19作为目标靶基因;针对23例肝细胞癌患者外周血的检测结果显示:外周血循环肿瘤细胞手术切除后较手术前靶基因表达量有所降低,但所筛选的AFP、GPC3、CK19三个基因在手术后1、3、5、7、10天没有检测到有统计学意义的变化.结果显示,HCC患者手术后外周血中CTCs较手术前有所降低,表明经手术切除肿瘤的治疗方式有可能预防HCC癌细胞的血行播散;在Sprinking实验中,以AFP、GPC3、CK19为检测靶基因的技术体系具有较高的特异性和灵敏度,可以作为研究HCC患者CTCs的目标靶基因.