【摘 要】
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目的探讨液氮冻存心脏瓣膜的合适冻存保护剂及降温方式。方法将健康捐赠者的心脏瓣膜剪切为7份:新鲜对照组1份,冻存液A、B、C 3个组每组2份,分别为-80℃直接降温组(G1组)和程
【机 构】
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山东大学齐鲁医院儿科; 山东大学齐鲁医院心脏外科; 山东大学齐鲁医院遗体捐献接受站;
【基金项目】
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山东省科技发展计划(2014GSF118131);山东大学基本科研业务费(2014QY003-11);深圳市科技研发基金知识创新计划(JCYJ20140418115449178);济南市2014科学技术发展计划(201403010);973项目(2012CB966504)
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目的探讨液氮冻存心脏瓣膜的合适冻存保护剂及降温方式。方法将健康捐赠者的心脏瓣膜剪切为7份:新鲜对照组1份,冻存液A、B、C 3个组每组2份,分别为-80℃直接降温组(G1组)和程控降温仪缓慢降温组(G2组)。采用苏木精-伊红染色、弹力纤维染色、Masson染色法观察显微结构变化,透射电子显微镜(TEM)观察超微结构变化,采用Western blotting法及免疫组织化学法检测瓣膜表面人类白细胞抗原复合体(HLA)的相对表达量,比较各组瓣膜组织免疫原性。结果低温冻存会造成瓣膜组织结构损伤,使用含DMSO和硫酸软骨素的冻存液B组结构最完整,组织损伤最小,HLA-I蛋白的表达明显下调;G2组与G1组相比,胶原纤维着色偏浅,纤维排列更加紊乱,但HLA-I蛋白的表达相对较低。结论同时含有DMSO和硫酸软骨素对冻存组织保护效果最好,免疫原性最低。-80℃直接降温更有利于胶原纤维的保存,但免疫原性高于程控降温法。
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