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采用受孕12.5 d、13.5 d、14.5 d的ICR品系小鼠的胚胎制备原代成纤维细胞,在相同条件下观察不同胚龄胚胎成纤维细胞的增殖情况.结果表明受孕13.5 d胚胎为分离小鼠胚胎原代成纤维细胞的最适胚龄.分离出的原代成纤维细胞在37℃时,用0.25%胰蛋白酶-0.02%EDTA消化组织的时间为3 min,可在培养3 d后传代.F1代和F2代较F3代成纤维细胞分泌的抑制干细胞分化因子LIF的量要多.小鼠胚胎成纤维细胞冻存于-135℃～-150℃10个月,复苏后能正常传代.丝裂霉素-C抑制胚胎成纤维细胞增