【摘 要】
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目的:探讨文蛤酶解多肽的制备工艺及对非酒精性脂肪肝(NAFLD)细胞模型的修复作用。方法:用质量浓度15μg/m L的软脂酸诱导正常肝Chang liver细胞建立NAFLD模型,以TG含量为指
【机 构】
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浙江海洋大学食品与医药学院浙江省海洋生物医用制品工程技术研究中心;
【基金项目】
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浙江省科技厅优先主题重大专项(2013C03036);浙江省自然科学基金项目(LY15C200016)
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目的:探讨文蛤酶解多肽的制备工艺及对非酒精性脂肪肝(NAFLD)细胞模型的修复作用。方法:用质量浓度15μg/m L的软脂酸诱导正常肝Chang liver细胞建立NAFLD模型,以TG含量为指标,筛选酶解文蛤内脏的最佳酶种,通过正交试验、超滤、G-25葡聚糖凝胶层析、高效液相等技术获得酶解产物。将其作用于NAFLD细胞模型,油红O染色后镜下观察形态,检测细胞中的MDA,GSH-ST,ALT,AST,SOD,γ-GT等含量。结果:软脂酸诱导Chang liver细胞48 h后获得NAFLD细胞模型;最佳酶种为碱性蛋白酶,酶解条件为40℃、pH9.5、料液比1∶2、酶解时间12 h,加酶量1 000 U/g;超滤后得到<5 ku酶解液,经G-25葡聚糖凝胶层析得到4个峰;峰Ⅰ组分的氨基酸序列为Gln-Leu-Asn-Trp-Asp。该多肽能明显降低NAFLD细胞模型内的TG含量,使MDA,ALT,AST,γ-GT的含量下降,SOD,GSH-ST的含量上升,与未用药的模型组细胞相比有统计学意义。结论 :经碱性蛋白酶酶解文蛤得到的多肽,对NAFLD细胞模型具有明显的修复作用。
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