【摘 要】
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目的观察大鼠肝星状细胞(HSC)活化不同时期外源活化相关CYP450亚型——CYP1A1,CYP1B1,CYP1A2,CYP2B1/2和CYP2E1 mRNA表达水平的变化规律。方法分离大鼠HSC,接种在无包被塑料
【机 构】
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武汉大学基础医学院药理学系; 右江民族医学院药理教研室; 发育毒性湖北省重点实验室;
【基金项目】
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The project supported by National Natural Science Foundation of China(81060040);National Natural Science Foundation of China(81072709);National Natural Science Foundation of China(81001466)~~
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目的观察大鼠肝星状细胞(HSC)活化不同时期外源活化相关CYP450亚型——CYP1A1,CYP1B1,CYP1A2,CYP2B1/2和CYP2E1 mRNA表达水平的变化规律。方法分离大鼠HSC,接种在无包被塑料培养瓶中作为HSC自氧化活化模型,免疫细胞化学法检测不同培养时间HSC活化标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达。实时定量RT-PCR法测定HSC自氧化激活的不同时期多种外源物活化相关CYP450亚型mRNA的表达变化。结果免疫细胞化学结果表明,在塑料培养瓶中培养1 d的HSC并不表达α-SMA,但随着培养时间的延长,α-SMA表达逐渐增强,培养11 d的HSC处于完全活化状态,能表达典型肌丝条纹和较强α-SMA,说明培养1,2,5和11 d的HSC分别处于未活化期、活化早期、中期和晚期。实时定量RT-PCR结果显示,在未活化的HSC(培养1 d)中,有CYP1A1,CYP1B1,CYP1A2,CYP2B1/2和CYP2E1的mRNA表达;在HSC活化早期(培养2 d),CYP1B1,CYP2B1/2,CYP2E1mRNA表达最高,分别为未活化HSC的2.1,1.6(P<0.05)和23.9(P<0.01)倍;而在活化中期(培养5d)及晚期(培养11 d),这些CYP亚型表达显著降低甚至测不出。然而,CYP1A1和CYP1A2在整个活化过程均持续下降。结论多种外源物活化相关CYP450亚型在HSC自氧化激活过程发生了明显改变,其中CYP1B1,CYP2B1/2和CYP2E1的mRNA表达在活化早期显著升高,这些变化可能与HSC的早期激活增殖有关。
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