口蹄疫病毒VP1基因的克隆及结构蛋白VP1的原核表达

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根据Genbank中的O型口蹄疫病毒全基因序列设计了一对扩增口蹄疫病毒VP1基因的引物,用该特异性表达引物从口蹄疫阳性质粒pMD—P1中扩增得到目的基因VP1(639bp)。用相同的限制性内切酶酶切目的基因和表达载体PET32a后构建重组表达载体.转化宿主菌BL21(DE3),经酶切及PCR鉴定筛选出阳性克隆.测序证明目的基因正确插入了表达载体,用不同浓度的IPTG诱导VP1基因的表达,收集菌液进行SDS—PAGE电泳,Westerll—blotting分析蛋白免疫原性。结果表明,VP1结构蛋白在大肠杆菌
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