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根据已发表的西尼罗河病毒（WNV）的DNA序列设计合成一对特异性引物,用聚合酶链式反应（PCR）扩增E蛋白结构域Ⅲ（E-DⅢ）的基因。将PCR产物克隆至pET28a原核表达载体上,获得重组表达质粒pET28a-E-DⅢ。将该质粒转化BL21（DE3）,经IPTG诱导后提取包涵体,纯化融合蛋白,通过SDS-PAGE和Western blot方法证实E-DⅢ的基因可以在大肠杆菌中高效表达。