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目的
探讨siRNA干扰EGFR表达对食管鳞癌和腺癌放射敏感性的影响。
方法以食管鳞癌、腺癌细胞系ECa-109、OE-19作为研究对象。脂质体转染化学合成的不同EGFR-siRNA和阴性-siRNA,通过RT-PCR及蛋白印迹法检测转染前后EGFR表达情况,CCK8法分析转染对细胞增殖活性影响。设ECa-109、OE-19细胞空白对照组(O1、O2组)、单纯照射组(R1、R2组)及EGFR-siRNA照射组(E-R1、E-R2组),单次照射0、2、4、6、8 Gy。克隆形成实验计算细胞存活分数及放射增敏比(SERD0值比),流式细胞仪检测EGFR-siRNA联合放射对细胞周期分布和细胞凋亡率影响,单次照射6 Gy。
结果EGFR-siRNA可明显下调两种细胞EGFR表达,且转染对细胞增殖抑制率<5%(4.9%、4.5%)。克隆形成实验结果显示E-R1、E-R2组细胞SF值低于O1、O2组,SERD0值比分别为1.40、1.01。流式细胞术结果显示E-R1组比E-R2组照后G2+M期比例增加、S期比例下降(P=0.016、0.028),细胞凋亡率也增高(P=0.007)。
结论与食管腺癌细胞相比,干扰EGFR表达显著提高了食管鳞癌细胞的放射敏感性。