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目的 建立稳定、高效表达重组铜绿假单胞菌外毒素A（rEPA）的工程菌发酵及表达产物纯化工艺。方法 规模化发酵表达rEPA的重组大肠杆菌rPE553D，离心收集菌体，渗透压调解使菌体周质间隙蛋白释放后，高速离心收集蛋白溶液。经DEAE Sepharose FF、Phenyl Sepharose 6FF疏水层析和SOURCE 30Q强离子交换层析，超滤浓缩纯化rEPA。用HPLC、SDS—PAGE和Western blot等方法检定生化和免疫学特性，并用小鼠和Vero细胞检定毒性。结果 每55L培养基中rEP