芪苓益肾通络方含药血清对肾小球系膜细胞cGMP/PKG信号通路的作用机制

来源 :中国老年学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:huishouzhong2
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目的 研究芪苓益肾通络方含药血清对肾小球系膜细胞环磷酸鸟苷(cGMP)/蛋白激酶(PK)G信号通路的作用机制。方法 30只SD大鼠随机分为健康组(健康大鼠)、通络方组(芪苓益肾通络方干预)、西药组[西药盐酸苯钠普利片(洛汀新)及格列喹酮比(糖适平干预)],每组10只,制备含药血清。噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖;流式细胞仪检测细胞凋亡。将HMCs细胞分为空白组(5.6 mmol/L低糖+10%健康大鼠血清)、肾病组(30 mmol/L高糖+10%健康大鼠血清)、低剂量组(30 mmol/L高糖+5%通络方组大鼠血清+5%的健康大鼠血清)、高剂量组(30 mmol/L高糖+10%通络方组大鼠血清)及对照组(30 mmol/L高糖+10%西药组大鼠血清)。MTT检测HMCs细胞OD值;流式细胞仪检测HMCs细胞凋亡率;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HMCs细胞中核转录因子(NF)-κB、单核细胞趋化蛋白(MCP)-1水平;黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶(SOD),硫代巴比妥酸法检测丙二醛(MDA);Western印迹测HMCs细胞中cGMP、PKG蛋白表达。结果 与空白组相比,肾病组细胞OD值升高,NF-κB、MCP-1、MDA增加,SOD、cGMP、PKG降低,差异有统计学意义(P<0.05),凋亡率无明显差异(P>0.05);与肾病组相比,低剂量组细胞OD值及NF-κB、MCP-1、MDA水平降低,SOD、cGMP、PKG增加,细胞凋亡率升高,差异有统计学意义(P<0.05);与低剂量组相比,高剂量组与对照组细胞OD值及NF-κB、MCP-1、MDA水平降低、细胞凋亡率升高,SOD、cGMP、PKG水平增加,差异有统计学意义(P<0.05);与高剂量组相比,对照组细胞增殖、凋亡、NF-κB、MCP-1、MDA、SOD水平比较无明显差异(P>0.05),cGMP、PKG蛋白水平明显降低(P<0.05)。结论 芪苓益肾通络方通过刺激cGMP的表达,进而激活PKG,改善炎性及氧化应激水平,调控高糖诱导的肾小球系膜细胞的生物学行为,对肾功能起到保护作用。
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