【摘 要】
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目的探讨Wnt经典通路相关因子Dickkopf蛋白1(DKK-1)、β-链蛋白(β-catenin)在糖基化终末产物(AGEs)介导的人牙周膜干细胞(h PDLSCs)骨分化过程中的变化。方法通过体外组织块
【机 构】
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遵义医学院附属口腔医院,贵阳市口腔医院牙周科,第四军医大学组织工程中心
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目的探讨Wnt经典通路相关因子Dickkopf蛋白1(DKK-1)、β-链蛋白(β-catenin)在糖基化终末产物(AGEs)介导的人牙周膜干细胞(h PDLSCs)骨分化过程中的变化。方法通过体外组织块法和有限稀释法克隆化培养获取h PDLSCs,实验分两组:正常h PDLSCs组(N-h PDLSCs组)和AGEs刺激的正常h PDLSCs组(A-h PDLSCs组)。对2组细胞成骨矿化诱导后行碱性磷酸酶(ALP)和茜素红染色;实时聚合酶链反应(real time PCR)检测成骨基因,以及Wnt经典通路中相关因子DKK-1、β-catenin;Western blot检测相关成骨蛋白、细胞核蛋白β-catenin。结果成骨诱导后,A-h PDLSCs组ALP染色明显浅于N-h PDLSCs组;茜素红染色A-h PDLSCs组钙化结节少于N-h PDLSCs组;real time PCR与Western blot的结果显示A-h PDLSCs组BSP、ALP、Runx-2的表达都较低,差异有统计学意义(P<0.05)。Wnt经典信号通路中相关因子:A-h PDLSCs组β-catenin表达高于N-h PDLSCs组,A-h PDLSCs组DKK-1表达明显低于N-h PDLSCs组,并且Weston blot显示A-h PDLSCs组核蛋白β-catenin的表达高于N-h PDLSCs组。结论 AGEs可以使h PDLSCs骨向分化过程中Wnt经典通路的抑制因子DKK-1下调,细胞核中的β-catenin表达升高,激活了Wnt经典通路,并且抑制了骨分化。
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