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目的 通过网络药理学预测落新妇苷治疗骨关节炎的潜在机制,并通过实验进行验证.方法 从PubChem获得落新妇苷分子化学式C21H22O11,通过PharmMapper和Swiss Target数据库筛选出与落新妇苷相关的靶点;在GeneCards、TTD、Disease Gene Search Engine 3个数据库筛选出与骨关节炎疾病密切相关的靶点基因;将落新妇苷-靶点基因和骨关节炎-靶点基因的网络合并,筛选出共同作用靶点,导入String数据库,导入Cytoscape进行可视化分析;将靶点基因上传到DAVID (https: //david.ncifcrf.gov/)进行基因功能和KEGG通路富集分析.建立白细胞介素(IL)-1β诱导的人软骨细胞模型,造模同时给予落新妇苷低、高质量浓度(12.5、25.0 μg/mL)干预,CCK8法检测药物干预1、2、3d软骨细胞活性;Western blotting法和实时荧光定量RCR法检测药物干预24 h后肿瘤坏死因子(TNF)-α和G1/S-特异性周期蛋白-D1 (CCND1)蛋白和mRNA表达.结果 通过挖掘数据获得377个与落新妇苷相关的潜在靶点和2 758个骨关节炎的潜在基因;对网络进行对接,获得43个潜在靶基因,随后构建PPI网络;关键基因为TNF、癌基因同源物(HRAS)、肿瘤标志物热休克蛋白90α(HSP90AAS)、淀粉样蛋白前体蛋白(APP)和CCND1;关键通路为AGE/RAGE信号通路、肿瘤聚糖信号通路、MAPK信号通路、P13K-AKT信号通路、细胞增殖、凋亡等.与模型组比较,落新妇苷低、高质量浓度组人软骨细胞吸光度(A450nm)值均显著升高,差异有统计学意义(P＜0.05),TNF-α蛋白和mRNA表达均显著降低(P＜0.05),CCND1蛋白和mRNA表达均显著升高(P＜0.05).结论 落新妇苷可能通过直接作用于STAT1、STAT3、RAS等靶点,干预AGE/RAGE通路,从而调节TNF-α和CCND1的表达,进而促进软骨细胞的增殖和抑制炎症因子的产生.