【摘 要】
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利用RT-PCR方法获得了番茄黑环病毒(TBRV)外壳蛋白(coat protein,CP)基因,将CP基因克隆到pMD19-T Simple载体,并进行测序,大小为1 399 bp。与GenBank中已报道的TBRV的CP基因
【机 构】
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山东出入境检验检疫局,青岛出入境检验检疫局,中国检验认证集团有限公司
【基金项目】
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国家质检总局科技计划项目(2011IK170)
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利用RT-PCR方法获得了番茄黑环病毒(TBRV)外壳蛋白(coat protein,CP)基因,将CP基因克隆到pMD19-T Simple载体,并进行测序,大小为1 399 bp。与GenBank中已报道的TBRV的CP基因核苷酸相似度达99%以上。将TBRV CP基因定向插入双酶切的pET30a中,成功构建了原核表达载体pET30a-TBRVCP,转化大肠杆菌BL-21,表达重组蛋白。SDS-PAGE电泳分析发现,通过诱导条件的优化,重组蛋白在37℃,1.0 mmol/L IPTG、4 h条件下表达量最高。
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