烟台黑猪SLA-2-YTH原核表达载体的构建及表达

来源 :中国畜牧兽医 | 被引量 : 0次 | 上传用户：shanshan0000

【摘要】

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为构建烟台黑猪SLA-2-YTH基因原核表达载体，本研究设计引物PCR扩增SLA-2-YTH胞外区，将其克隆至pMD 19-T Simple载体，筛选阳性克隆。阳性克隆经酶切后，进一步与表达载体pET-28a（＋）连

【作者】

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姜巍董宋鹏李子彬姜龙冯磊高凤山

【机构】

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大连大学生命科学与技术学院,吉林农业大学生命科学学院,河北省涿鹿县医院

【出处】

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中国畜牧兽医

【发表日期】

：

2014年4期

【关键词】

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烟台黑猪猪白细胞抗原原核表达载体 Yantai Black pig swine leukocyte antigen prokaryotic express

【基金项目】

：

基金项目：国家自然科学基金项目（31172304）,地方高校国家级大学生创新创业训练计划（201211258006）.

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为构建烟台黑猪SLA-2-YTH基因原核表达载体，本研究设计引物PCR扩增SLA-2-YTH胞外区，将其克隆至pMD 19-T Simple载体，筛选阳性克隆。阳性克隆经酶切后，进一步与表达载体pET-28a（＋）连接，转化BL21（Rosseta）感受态细胞并进行诱导表达，SDS-PAGE检测蛋白表达情况。结果显示，SLA-2-YTH胞外区亚克隆大小为834bp，酶切鉴定证实其成功插入pET-28a（＋）表达载体。SDS-PAGE结果显示，SLA-2-YTH基因导入宿主菌后成功表达，蛋白大小约31．0k

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