目的应用抗内毒素受体-Toll样受体4(TLR4)抗体体内注射观察其对小鼠实验性急性坏死型胰腺炎(ANP)的影响,探讨内毒素信号通路,尤其是Toll样受体4在ANP发生中的介导作用.方法 10只BALB/c小鼠随机分为ANP组和ANP TLR4抗体处理组.ANP模型制备采用腹腔内注射雨蛙肽和脂多糖(LPS).TLR4抗体处理组于LPS注射前15 min静脉注射TLR4单克隆抗体,剂量为20 μg.12 h后处死小鼠并收取标本.测定血清淀粉酶和乳酸脱氢酶(LDH)水平;胰腺组织切片行HE染色并作病理评分;RT-PCR检测胰腺组织炎性介质TNF-α、IL-1β和ICAM-1 mRNA表达变化;免疫组化和western blot检测胰原组织核因子-κΒ(NF-κΒ)p65亚单位蛋白表达的改变;酶组织化学方法检测中性粒细胞特异性髓过氧化物酶(MPO)活性的变化.结果与ANP模型组相比,TLR4抗体处理组血清淀粉酶活性[12 612±5 706 U/L vs 23 412±8 922 U/L,P＜0.05]和LDH活性[1 926±400 U/L vs 2 574±277 U/L,P＜0.05],较ANP模型组显著升高;病理评分结果显示,TLR4抗体处理组胰腺组织坏死和炎症反应程度明显加重;胰腺组织炎性介质TNF-α、IL-1β和ICAM-1mRAN表达呈显著上调;胰原组织NF-κB p65亚单位的蛋白表达也呈上调趋势;反映中性粒细胞活化程度的胰腺组织MPO活性显著升高.结论抗内毒素受体-TLR4抗体体内注射后使ANP严重程度加重,其可能原因是该抗体与LPS具有共同的抗原表位从而模拟LPS参与了内毒信号传导,进一步激活NF-κB并上调细胞因子、炎性介质的表达,增加中性粒细胞的活化程度.提示内毒素信号通路TLR4在ANP发病过程中起重要的促进作用.
Toll样受体4在实验性急性坏死型胰腺炎形成中的介导作用
【摘 要】
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目的应用抗内毒素受体-Toll样受体4(TLR4)抗体体内注射观察其对小鼠实验性急性坏死型胰腺炎(ANP)的影响,探讨内毒素信号通路,尤其是Toll样受体4在ANP发生中的介导作用.方法 10只BALB/c小鼠随机分为ANP组和ANP TLR4抗体处理组.ANP模型制备采用腹腔内注射雨蛙肽和脂多糖(LPS).TLR4抗体处理组于LPS注射前15 min静脉注射TLR4单克隆抗体,剂量为20 μg.
【机 构】
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200080,上海,上海交通大学附属第一人民医院消化科
【出 处】
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中华急诊医学杂志
【发表日期】
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2003年12期
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