结核分支杆菌MPT64基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达、纯化和诊断运用

来源 :中国现代医学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：danielliang

【摘要】

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目的利用大肠杆菌表达系统大量获得重组MPT64蛋白,分析其生物学、免疫学特性,并初步评估其在结核病血清学诊断方面的价值.方法用聚合酶链反应(PCR)方法从结核分支杆菌H37Rv中

【作者】

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熊志红庄玉辉张晓刚何秀云董恩军

【机构】

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解放军309医院

【出处】

：

中国现代医学杂志

【发表日期】

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2004年21期

【关键词】

：

结核分支杆菌 MPT64 基因表达诊断 mycobacterium tuberculosis MPT64 gene expression serodiagno

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目的利用大肠杆菌表达系统大量获得重组MPT64蛋白,分析其生物学、免疫学特性,并初步评估其在结核病血清学诊断方面的价值.方法用聚合酶链反应(PCR)方法从结核分支杆菌H37Rv中获得了MPT64基因,并构建大肠杆菌表达株;聚丙烯酰胺凝胶电泳重组蛋白;Western印迹及酶联免疫吸附测定法(ELISA)分析重组蛋白免疫原性,并检测血清的抗结核抗体.结果构建了能表达重组MPT64的大肠杆菌工程菌,表达的重组蛋白蛋白为可溶性形式,表达量占细胞总蛋白的30%,分子量约23kD.经离子交换柱纯化后,重组蛋白纯度达9

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