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目的;对A组轮状病毒主要结构抗原VP4基因中PacⅠ的识别序列进行无义突变以便于用腺病毒Ad-Easy载体系统进行表达。方法:采用大引物PCR方法,通过3条引物,两轮PCR反应,获得VP4基因的突变体,并经核酸序列分析证实。结果:PacⅠ识别的8个碱基序列TTAAT-TAA,突变为CTGATCAA。结论;大引物PCR是对核酸进行突变的一种简便,快速的方法。