【摘 要】
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目的 分析半枝莲抑制宫颈癌Hela细胞增殖和凋亡的作用机制.方法 人宫颈癌Hela细胞株常规传代,取对数生长的Hela细胞,应用CCK-8法、Annexin V-FITC/PI双标记法检测半枝莲对Hela细胞增殖、凋亡的影响,并计算其作用48 h时的半抑制浓度(IC50);应用PI单标记法检测半枝莲对Hela细胞周期的影响;应用Western Blot检测自噬相关蛋白LC3、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路蛋白磷酸化.结果 与0 mg/ml浓
【机 构】
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671067 四川省攀枝花市中心医院妇科;攀枝花市仁和区人民医院
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目的 分析半枝莲抑制宫颈癌Hela细胞增殖和凋亡的作用机制.方法 人宫颈癌Hela细胞株常规传代,取对数生长的Hela细胞,应用CCK-8法、Annexin V-FITC/PI双标记法检测半枝莲对Hela细胞增殖、凋亡的影响,并计算其作用48 h时的半抑制浓度(IC50);应用PI单标记法检测半枝莲对Hela细胞周期的影响;应用Western Blot检测自噬相关蛋白LC3、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路蛋白磷酸化.结果 与0 mg/ml浓度比较,0.30 mg/ml、0.34 mg/ml、0.38 mg/ml、0.42 mg/ml、0.46 mg/ml、0.56 mg/ml浓度的半枝莲作用48 h后,细胞增殖抑制率显著更高,作用48 h时半枝莲的IC50为0.421 mg/ml;Hela细胞经0 mg/ml、0.34 mg/ml、0.38 mg/ml、0.42 mg/ml浓度的半枝莲培养48 h后,细胞凋亡率逐渐上升(P＜0.05),且宫颈癌Hela细胞增殖抑制率、细胞凋亡率呈显著剂量依赖性;与0 mg/ml浓度比较,随着半枝莲浓度上升,Hela细胞G0/G1所占比例也逐渐上升,S期占比逐渐下降,呈现显著的G0/G1期阻滞现象;与0 mg/ml浓度比较,0.34 mg/ml、0.38 mg/ml、0.42 mg/ml浓度LC3Ⅱ-/LC3-Ⅰ显著上升,p-PⅠ3K、p-AKT、p-mTOR蛋白表达量显著下降,且LC3Ⅱ-/LC3-Ⅰ随半枝莲浓度增加而上升,p-PⅠ3K、p-AKT、p-mTOR蛋白表达量随半枝莲浓度上升而下降.结论 半枝莲可通过诱导宫颈癌Hela细胞自噬活性,抑制PⅠ3K/AKT/mTOR信号通路蛋白磷酸化来发挥抗肿瘤作用.
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